间质干细胞培养原理概述
间质干细胞(mesenchymal stem cell，MSC)是一群中胚层来源的具有自我更新和多向分化潜能的多能干细胞，在适宜的培养条件下可分化成多种组织细胞，包括成骨细胞、软骨细胞、肌肉细胞、脂肪细胞等。
间质干细胞最早是从骨髓中分离得到的，正常情况下，它在骨髓中的比例非常低，仅占单核细胞的1/105 ~1/104 。骨髓中单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞，其体积、形态和密度与其他细胞不同，红细胞和多核白细胞密度较大，为1.090 g/ml左右，而淋巴细胞和单核细胞密度为1.075~1.090 g/ml，血小板为1.030~1.035 g/ml。为此利用一种密度介于1.075~1.092 g/ml之间而近于等渗的溶液(分层液)进行密度梯度离心，使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，从而将各种血细胞加以分离。常用的分层液有Ficoll和Percoll两种。
在骨髓的原代培养物中，除了贴壁生长的成纤维细胞样的间质干细胞外，还混杂着一些巨噬细胞、单核细胞、造血细胞及红细胞等，要得到较均一的间质干细胞，必须除去其他细胞。根据其他细胞的特性，可采用不同的方式排除它们。对于红细胞，DC-CIK委托培养，因其不贴壁，可通过换液除去。对于贴壁的单核巨噬细胞，可根据其黏附能力的不同，通过调整Trypsin/EDTA 的消化时间，CIK培养，保证间质干细胞在短暂的作用时间内与塑料培养瓶壁分离，而巨噬细胞、单核细胞、造血细胞等仍贴附于培养瓶壁，从而使间质干细胞与其他的贴壁细胞得到分离。
在传代培养中，接种密度是影响体外培养间质干细胞增殖潜能的重要因素。低密度接种时，间质干细胞的增殖能力明显提高，而诱导细胞分化时则需要较高的细胞密度，CIK细胞，这可能与分化时细胞与细胞间的相互作用有关。而在培养过程中，若细胞过度融合会促进其分化趋向，故要保持干细胞未分化状态，要及时传代。
②按来源及特征，干细胞可分为胚胎干细胞、成体干细胞、iPS细胞：
胚胎干细胞（Embryonic Stem cells，ESC）：当受精卵分裂发育成囊胚时，内层细胞团的细胞即为胚胎干细胞。胚胎干细胞是一种高度未分化细胞。它具有发育的全能性，能分化出成体动物的所有组织和器官，新疆CIK，包括生殖细胞。研究和利用胚胎干细胞是当前生物工程领域的核心问题之一。体外细胞的无限扩增性是ESC研究和应用的前提和关键，ESC可以提供无限的细胞来源。但是胚胎干细胞表达主要组织相容性抗体MHC，移植后可引起免疫排斥反应；向某一个方面定向诱导分化仍存在技术障碍；具有致瘤性，能形成畸胎瘤；它的获得需要破坏一个胚胎，存在伦理问题，所以目前规定只可用于研究，不可用于临床。
CIK细胞_济南赛尔生物(在线咨询)_新疆CIK由济南赛尔生物科技有限公司提供。济南赛尔生物科技有限公司（www.jncell.com）坚持“以人为本”的企业理念，拥有一支专业的员工队伍，力求提供好的产品和服务回馈社会，并欢迎广大新老客户光临惠顾，真诚合作、共创美好未来。济南赛尔生物——您可信赖的朋友，公司地址：济南药谷B座13层，联系人：张经理。
