间质干细胞培养原理概述
间质干细胞(mesenchymal stem cell，MSC)是一群中胚层来源的具有自我更新和多向分化潜能的多能干细胞，在适宜的培养条件下可分化成多种组织细胞，包括成骨细胞、软骨细胞、肌肉细胞、脂肪细胞等。
间质干细胞最早是从骨髓中分离得到的，正常情况下，它在骨髓中的比例非常低，仅占单核细胞的1/105 ~1/104 。骨髓中单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞，其体积、形态和密度与其他细胞不同，红细胞和多核白细胞密度较大，为1.090 g/ml左右，脐带间充质干细胞，而淋巴细胞和单核细胞密度为1.075~1.090 g/ml，血小板为1.030~1.035 g/ml。为此利用一种密度介于1.075~1.092 g/ml之间而近于等渗的溶液(分层液)进行密度梯度离心，使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，从而将各种血细胞加以分离。常用的分层液有Ficoll和Percoll两种。
在骨髓的原代培养物中，除了贴壁生长的成纤维细胞样的间质干细胞外，还混杂着一些巨噬细胞、单核细胞、造血细胞及红细胞等，要得到较均一的间质干细胞，必须除去其他细胞。根据其他细胞的特性，广东干细胞，可采用不同的方式排除它们。对于红细胞，因其不贴壁，可通过换液除去。对于贴壁的单核巨噬细胞，可根据其黏附能力的不同，通过调整Trypsin/EDTA 的消化时间，保证间质干细胞在短暂的作用时间内与塑料培养瓶壁分离，而巨噬细胞、单核细胞、造血细胞等仍贴附于培养瓶壁，从而使间质干细胞与其他的贴壁细胞得到分离。
在传代培养中，接种密度是影响体外培养间质干细胞增殖潜能的重要因素。低密度接种时，间质干细胞的增殖能力明显提高，而诱导细胞分化时则需要较高的细胞密度，这可能与分化时细胞与细胞间的相互作用有关。而在培养过程中，若细胞过度融合会促进其分化趋向，故要保持干细胞未分化状态，要及时传代。
诱导性多能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPS）：这可是近几年干细胞研究中最热的热点。这种细胞的来源是自体的成体细胞，甚至是终末分化的细胞（也就是没有任何分化能力的细胞），干细胞美容 ，比如皮肤成纤维细胞、肾管状细胞、淋巴细胞等，通过体外人工诱导的方法，比如用病毒给它插入几个基因之类，使它们回到最初的幼稚状态，重新具备了多能性。iPS细胞证明了可以用已知的几种因子在体外逆转已经分化的细胞， 使之成为具有发育全能性的细胞，这种细胞理论上讲是要与胚胎干细胞有着同样的功能和特点的多能性干细胞，被誉为人类生命科学新的里程碑。但是，间充质干细胞，用逆转录病毒导入基因，染色体会因此受伤，容易发生癌变； 另外还存在着重编技术效率低以及不断涌现的各种新问题。距离临床应用有相当长的一段时间，但却是一条具有前景和希望的途径。
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